二氧化碳既是细胞的代谢产物，是细胞生长的必需成分，又与维持培养液的pH有关。

细胞的培养中，氧气、二氧化碳都是细胞生长的必要条件。氧气参与细胞的三羧酸循环，为细胞生存、代谢与合成提供能量；二氧化碳既是细胞的代谢产物，是细胞生长的必需成分，又与维持培养液的pH有关。大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2—7.4。CO2既是细胞代谢产物也是细胞所需成分，主要与维持培养液的pH有直接关系。动物细胞多数需要微碱性环境，pH为7.4左右。在细胞培养过程中，随着CO2释放量的增多，培养基会变酸，因此常加入NaHCO3来调节pH。NaHCO3具有释放CO2的倾向，加入CO2可以抑制这个反应的进行。养箱中CO2浓度应与培养液中NaHCO3浓度相平衡，在细胞培养中，以5%的二氧化碳气体比例为宜。

细胞培养其他必须的因素：

1、无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖，必须要确保无菌工作区域。

2、合适的温度：一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37℃，不适宜的环境温度会影响细胞的生长。

3、适宜的渗透压：高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。